CFSE标记结合流式细胞术检测肝星状细胞抑制CD4+/CD8+T淋巴细胞增殖的研究

作者：吴玉婧; 赵超; 孙淑惠; 郭津生

来源：老年医学与保健, 2016, 22(05): 277-302.

DOI：10.3969/j.issn.1008-8296.2016.05.05

• 肝星状细胞
• 羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺脂
• CD4-阳性T淋巴细胞
• CD8-阳性T淋巴细胞

目的研究羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺脂(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)标记结合流式细胞术在检测体外共培养体系中T淋巴细胞亚群增殖中的应用,并利用此方法研究小鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)对T淋巴细胞亚群增殖的影响。方法采用磁珠分选雄性C57/B6小鼠脾脏T淋巴细胞,经CFSE标记后与脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)刺激或不刺激的C57/B6来源的小鼠肝星状细胞系JSl共培养3 d,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群的增殖,flowjo软件分析增殖动力模型。结果JSl可以抑制CD4+和CD8+T淋巴细胞增殖的能力,并且当JSl/T细胞比值增加时,抑制作用更强。LPS的刺激不影响JSl对CD4+和CD8+T细胞增殖的抑制作用。结论肝星状细胞JS1具有免疫抑制能力,CFSE标记结合流式细胞术是一种可靠的分析淋巴细胞增殖的工具,可以有效检测出共培养体系中细胞亚群的增殖情况,在研究体外淋巴细胞功能中具有重要的应用价值。

• 单位
  复旦大学附属中山医院; 基础医学院