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摘要
目的:探讨三结构域蛋白59(tripartite-motif protein 59,TRIM59)对于人肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)细胞增殖与迁移的影响以及波形蛋白(vimentin, VIM)作为其中潜在调控靶点的相关性研究。方法:通过细胞培养和细胞转染得到所需要的人HCC细胞,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测其中TRIM59 mRNA的表达水平并通过蛋白印迹法(Western blot)检测TRIM59蛋白质的表达水平;采用慢病毒介导的基因沉默效应与TRIM59过表达质粒进行转染介导的基因过表达效应调控TRIM59基因的表达,通过集落形成试验检测TRIM59处于不同表达水平时的肝癌细胞系的增殖能力差别;通过细胞划痕试验检测TRIM59基因处于不同表达水平时HCC细胞的迁移能力差异;并通过考马斯亮蓝法(Bradford法)检测TRIM59基因处于不同表达水平时,VIM的表达情况,通过统计学方法研究TRIM59及VIM表达的相关性。结果:通过定量qRT-PCR与Western blot检测,在所选取的HCC细胞系中,TRIM59 mRNA及TRIM59蛋白质的表达量均高于普通肝细胞(P均<0.01)。细胞集落形成实验显示,在所选的肝癌细胞中,TRIM59的表达与HCC的细胞集落形成数量呈正相关(P均<0.01)。细胞划痕试验显示,TRIM59的表达与HCC的细胞迁移能力呈正相关(P均<0.05)。Bradford法检测显示,在所选取的HCC细胞系中,TRIM59蛋白质的表达与VIM的表达呈正相关(P均<0.01)。结论:TRIM59促进人HCC细胞的增殖与迁移,可能是通过调控VIM表达而完成,可为HCC的靶向治疗提供新的靶点。
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