基于FOXM1启动子示踪体系对MDA-MB-231细胞亚群的分选与鉴定

作者：汪运超; 李子青; 向勤; 谭拥军^*

来源：生物学杂志, 2020, 37(06): 28-32.

• 启动子示踪
• 慢病毒载体
• FOXM1
• 乳腺癌细胞MDA-MB-231

为实现细胞内FOXM1表达的可视化,采用基因工程的方法构建慢病毒载体(Lv-PromoterFOXM1-GFP)。该慢病毒载体携带1.2 kb的FOXM1启动子区域和绿色荧光蛋白(GFP)基因。将Lv-PromoterFOXM1-GFP与辅助质粒共转染HEK293T细胞,包装慢病毒并感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞。以未感染病毒的MDA-MB-231细胞样品作为阴性对照,经流式细胞仪分析,发现实验组GFP阳性细胞数升高,证明慢病毒感染成功。以GFP的表达为标准,将Lv-PromoterFOXM1-GFP感染的MDA-MB-231细胞通过流式分选,获得GFP-High细胞亚群和GFP-Low细胞亚群。通过Western Blot证实根据GFP所分选出的两组细胞亚群的FOXM1表达量有显著差别,且GFP水平可以对应细胞内的内源FOXM1表达水平。因此在癌细胞中以FOXM1表达水平的高低分离出癌细胞亚群,为研究FOXM1在乳腺癌发生发展中的功能提供了研究材料,也对进一步研究FOXM1的生物学特性以及靶向肿瘤诊断与治疗具有十分重要的意义。

• 单位
  湖南大学