培养雪旺细胞NGF、CNTF和GDNF共表达和共定位实验研究

作者：陈菁; 楚燕飞; 顾玉东; 李兵仓

来源：中华手外科杂志, 2005, (05): 64-66.

• 雪旺细胞
• 神经生长因子
• 神经营养因子
• 共表达
• 共定位

目的探讨将雪旺细胞和背根节神经元共同培养后去除背根节神经元后雪旺细胞神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)、睫状神经营养因子(ciliangneurotrophicfactor,CNTF)和胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)共表达变化特点及其细胞共定位。方法运用多彩色荧光原位杂交和计算机图像处理技术实现雪旺细胞NGF、CNTF和GDNFmRNA共表达变化的定量分析和细胞共定位,并通过免疫组织化学方法验证有关结果。结果NGF、CNTF和GDNFmRNA表达变化可同时定位于单个雪旺细胞;通过mRNA和蛋白表达水平的图像分析发现,去除背根节神经元后NGF和GDNF表达在迅速下降后随即逐渐增高,但2周时仍低于共培养表达水平(P<0.05),CNTF表达则持续下降(P<0.01)。结论雪旺细胞和背根节神经元共同培养后建立相互营养支持的体系,当失去神经元营养支持后,需要分泌神经生长因子和多种神经营养因子以维持自身环境的稳定;同时上述研究提供的方法能对雪旺细胞中多种神经营养因子的共表达定位进行可视化研究。

• 单位
  第三军医大学; 复旦大学附属华山医院