黄癸素通过ZFPM2-AS1/miR-519e-5p对神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响

作者：艾尼娃·克然木; 阿地来古丽·艾音丁; 李万富^*; 鹿洪亭

来源：沈阳药科大学学报, 2022, 39(07): 818-827.

DOI：10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2020.1268

• 黄癸素
• 神经母细胞瘤
• 增殖
• 凋亡
• ZFPM2-AS1
• miR-519e-5p

目的 探讨黄癸素(luteolin)是否通过长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)ZFPM2反义RNA 1(ZFPM2-AS1)/微小RNA(miRNA)-519e-5p轴影响神经母细胞瘤细胞的增殖和凋亡。方法 将神经母细胞瘤细胞分为对照组，黄癸素低、中、高剂量组(1、2、8 mg·L-1黄癸素),si-NC组(转染si-NC),si-ZFPM2-AS1组(转染si-ZFPM2-AS1),黄癸素高剂量+pcDNA组(8 mg·L-1黄癸素处理前转染pcDNA),黄癸素高剂量+pcDNA-ZFPM2-AS1组(8 mg·L-1黄癸素处理前转染pcDNA-ZFPM2-AS1),miR-NC组(转染miR-NC),miR-519e-5p组(转染miR-519e-5p mimic)。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法、集落形成实验、流式细胞术、免疫印迹实验(Western blotting)和定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测神经母细胞瘤细胞的活力、集落形成、凋亡率、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和ZFPM2-AS1、miR-519e-5p表达。生物信息学StarBase软件与双荧光素酶报告实验分析ZFPM2-AS1与miR-519e-5p之间的靶向结合。结果 与对照组或黄癸素低剂量组相比，黄癸素中剂量组和黄癸素高剂量组神经母细胞瘤细胞OD值、集落形成数、Bcl-2蛋白、ZFPM2-AS1表达量降低，细胞凋亡率、Bax蛋白、miR-519e-5p表达量升高(P<0.05),对照组与黄癸素低剂量组各指标比较差异不显著。si-ZFPM2-AS1组神经母细胞瘤细胞中miR-519e-5p表达量、凋亡率和Bax蛋白表达量比si-NC组高，OD值、集落形成数、Bcl-2蛋白表达量比si-NC组低(P<0.05)。与黄癸素高剂量+pcDNA组相比，黄癸素高剂量+pcDNA-ZFPM2-AS1组神经母细胞瘤细胞miR-519e-5p表达量、凋亡率、Bax蛋白表达量降低，OD值、集落形成数、Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.05)。ZFPM2-AS1可以靶向miR-519e-5p。miR-519e-5p组神经母细胞瘤细胞OD值、集落形成数、Bcl-2蛋白表达量比miR-NC组低，凋亡率、Bax蛋白表达量比miR-NC组高(P<0.05)。结论 黄癸素可以通过调控ZFPM2-AS1/miR-519e-5p轴抑制神经母细胞瘤细胞的增殖并诱导其凋亡。

• 单位
  青岛大学附属医院; 乌鲁木齐市第一人民医院; 新疆医科大学第一附属医院