母猪初乳中猪流行性腹泻病毒SIgA抗体ELISA检测方法的建立及应用

作者:朱利塞; 李菲; 王娟; 邓胜朝; 袁丽英; 王贵平; 贾爱卿*
来源:中国动物传染病学报, 2023, 31(01): 55-60.
DOI:10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20211103.006

摘要

为了建立检测母猪初乳中猪流行性腹泻病毒分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的方法,本研究将原核表达的刺突蛋白S1作为包被抗原,辣根过氧化物酶(HRP)标记的鼠抗猪免疫球蛋白A(Ig A)的单克隆抗体作为二抗,并利用棋盘法确定了最优反应条件:S1蛋白的包被量为400 ng,二抗的稀释倍数为250倍,二抗的反应时间为45 min。对该检测方法的特异性、敏感性及重复性鉴定结果显示,母猪初乳中猪流行性腹泻病毒SIgA的检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点。利用建立的ELISA方法对母猪分娩后不同时间采集的乳汁样品进行测定,发现不同时间点的乳汁样品中SIgA含量具有一定的消长规律,结果与其他文献报道的基本一致。该方法的建立为评价猪初乳中SIg A的抗体水平及PEDV疫苗的黏膜免疫效果提供了技术手段。