摘要

背景:采取有效措施修复坏死心肌成为临床治疗心肌梗死的新方向。目的:探讨5-氮杂胞苷联合血管紧张素Ⅱ对小鼠脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化的影响。方法:取20只4周龄ICR小鼠,利用Ⅰ型胶原酶消化法获得脂肪间充质干细胞,观察细胞的形态学特点,运用MTT法检测细胞的増殖情况,运用免疫荧光技术检测细胞表面抗原CD90,CD105,CD73,CD45的表达。第4代脂肪间充质干细胞培养24 h后,更换为含15μmol/L 5-氮杂胞苷和15μmol/L 5-氮杂胞苷+0.1μmol/L血管紧张素Ⅱ的培养基诱导24 h,然后更换为完全培养基,Western Blot检测细胞中c Tn T蛋白表达。结果与结论:①原代脂肪间充质干细胞胞核较小,呈梭形、星形,传代后细胞体积增大,形态趋于一致,排列规则;②第3代小鼠脂肪间充质干细胞的生长曲线呈现"S"形,第1-3天为潜伏期,第4天进入对数生长期,第5-7天细胞生长达到峰值,进入平稳期;③第4代脂肪间充质干细胞表面CD90、CD105及CD73呈阳性表达,CD45阴性表达;④5-氮杂胞苷联合血管紧张素Ⅱ组心肌细胞中c Tn T蛋白表达量显著高于5-氮杂胞苷(P<0.05);⑤结果表明,5-氮杂胞苷联合血管紧张素Ⅱ能够显著促进脂肪间充质干细胞向心肌细胞样细胞分化。