摘要
目的 探讨马钱苷(Loganin)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响及分子机制。方法 常规培养人胃癌细胞株AGS、BGC823及SGC7901。噻唑蓝(MTT)技术检测Loganin干预对细胞活性的影响。划痕实验及Transwell小室侵袭实验检测Loganin对BGC823细胞迁移及侵袭能力的影响。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)方法检测BGC823细胞株在药物干预前后相关基因和磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路蛋白变化。结果 噻唑蓝(MTT)结果显示,Loganin作用48 h后,AGS、BGC823及SGC7901细胞的活性分别为(0.748±0.051)、(0.581±0.042)、(0.412±0.037),BGC823的活性最低(F=44.101,P<0.01)。随着Loganin剂量增加,增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA和蛋白表达水平逐渐降低(F=36.298、47.942,P<0.01)。与对照组比较,Loganin作用后BGC823细胞的迁移、侵袭能力下降,高剂量(200 mg/L)Loganin的作用比低剂量组(50 mg/L)明显(迁移:F=87.750,P<0.01;侵袭:F=85.749,P<0.01)。qPCR和Western blot结果显示,与对照组比较,Loganin作用后BGC823细胞侵袭迁移相关基因的mRNA和蛋白水平发生改变,高剂量Loganin作用更明显(P<0.01)。qPCR和Western blot结果显示,与对照组比较,Loganin作用后,BGC823细胞EMT相关基因发生改变,高剂量Loganin作用更明显(P<0.01)。Loganin作用后,BGC823细胞的PI3K-Akt信号通路的活性减弱,p-PI3K和p-Akt的表达明显降低,高剂量Loganin的作用更明显(F=38.590、63.563,P<0.01)。结论 Loganin可能通过调控PI3K-Akt信号通路的活性而抑制胃癌细胞EMT。
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单位河北大学附属医院