摘要
为了解microRNA(mi RNA)调控巨噬细胞游走抑制因子(MIF)抗东方泰勒虫感染长角血蜱的作用,利用PCR扩增获得MIF基因的完整ORF,并进行体外原核表达,制备抗原免疫家兔,验证MIF重组蛋白对长角血蜱发育的影响。另外,预测可能调控MIF基因的mi RNA分子,用双荧光素酶报告系统分析mi RNA与靶标基因之间的调控关系,并解析此作用下靶标基因引起的抗病原作用。结果显示,MIF基因是一个包含348 bp核酸,编码116个氨基酸的片段。动物免疫试验证实,MIF+GST重组蛋白对蜱发育的各项生理指标影响较小。并且MIF受mi R-654的负调控,其调控效率达到60%。在蜱体中,mi RNA抑制后的MIF表达对东方泰勒虫感染不同发育阶段的长角血蜱有一定的识别和清除作用,可降低蜱体中约55%的虫体。尽管MIF对蜱的发育没有明显影响,但是在蜱抗病原感染过程中扮演着重要的角色。mi RNA作为功能基因的重要调控因子,在MIF识别和清除病原方面发挥着重要作用。为进一步蜱传疾病的防控提供了新的策略。
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单位农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所