miR-149-5p靶向FGF21促进大鼠心肌细胞的缺氧/复氧损伤

作者：蒋先训; 张凯; 张鹰

来源：解放军医学杂志, 2022, 1-14.

• miR-149-5p
• 缺血再灌注
• 成纤维细胞生长因子21
• 细胞凋亡

目的 探究miR-149-5p与成纤维细胞生长因子21（FGF21）的靶向关系，及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的影响。方法 将10只C56BL/6J雄性小鼠构建缺血再灌注（I/R）模型，qRT-PCR法检测I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p水平变化。将培养至生长对数期的H9c2大鼠心肌细胞，分为对照组、H/R组、H/R+miR-149-5p inhibitor组、H/R+miR-149-5p NC组、H/R+miR-149-5p mimics组、H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组，并诱导H/R模型及转染处理。ELISA检测H9c2细胞中乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）的活性；MTT法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡情况；qRT-PCR检测细胞中miR-149-5p水平；Western blotting检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、FGF21蛋白表达水平；双荧光素酶测定miR-149-5p与FGF21基因的靶向关系。结果 与假手术组比较，I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p水平明显升高（P＜0.05）。与对照组比较，H/R组H9c2细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P＜0.05），细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）；与H/R组和H/R+miR-149-5p NC组比较，H/R+miR-149-5p inhibitor组细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显降低（P＜0.05），细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平均明显升高（P＜0.05）；与H/R组比较，H/R+miR-149-5p mimics组H9c2细胞凋亡率、LDH和CK活性及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P＜0.05），细胞活力及FGF21、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低（P＜0.05）。与H/R+miR-149-5p mimics组比较，H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组H9c2细胞凋亡率及LDH和CK活性均明显降低（P＜0.05），细胞活力明显升高（P＜0.05）。双荧光素酶检测结果显示miR-149-5p与FGF21基因有靶向调控关系。结论：miR-149-5p在I/R小鼠心肌组织中明显上调，可负调控FGF21水平，导致H/R处理的大鼠心肌细胞活力下降和凋亡增加。

• 单位
  南华大学附属第二医院