灵芝菌生物转化对何首乌特异质肝毒性的影响

作者：段淇轩; 林艳^*

来源：药物评价研究, 2023, 46(04): 781-787.

• 何首乌
• 灵芝菌
• 特异质肝毒性
• 二苯乙烯苷
• 生物转化减毒

目的 建立灵芝菌与何首乌双向发酵的最佳发酵体系，并探讨灵芝菌生物转化对何首乌特异质肝毒性的影响。方法 70%乙醇回流提取生何首乌粉末制备何首乌醇提物(PMEE，二苯乙烯苷质量分数为7.85%);HPLC法检测二苯乙烯苷转化率，考察底物浓度、发酵温度、转速、瓶装量、接种量、发酵时间6个因素对灵芝菌与PMEE双向发酵体系的影响，并制备不同二苯乙烯苷转化率的发酵物。采用脂多糖(LPS)制备SD大鼠特异质肝毒性模型，考察PMEE高、低剂量(以生首乌计2.16、1.08 g·kg-1，分别为4、2倍临床等效剂量)及灵芝菌转化后PMEE发酵物(二苯乙烯苷的转化率分别为0、50%、75%、100%，以生首乌计2.16 g·kg-1)的特异质肝毒性，ELISA法检测血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的释放量，HE染色法观察肝脏病理学改变。结果 灵芝菌转化PMEE的最佳发酵条件为发酵温度28℃、摇床转速180 r·min-1、菌种接种量2.5%、培养基瓶装量25%、底物质量浓度19.11 mg·mL-1，转化时间88～104 h，二苯乙烯苷转化率与转化时间呈一定的线性关系，线性方程为Y=20.657X-12.959,R2=0.988。与对照组比较，模型组的ALT、AST、LDH无显著性差异，提示LPS特异质肝毒性模型造模成功；与模型组比较，PMEE灵芝菌转化后二苯乙烯苷转化率为75%、100%组ALT、AST、LDH的释放量无显著差异，其他给药组ALT、AST、LDH释放量均显著升高(P<0.01)，且ALT、AST、LDH的释放量随二苯乙烯苷含量的减少而减少。与对照组相比，模型组有少量炎症因子增加，但无显著性病理学改变，未见肝损伤现象；PMEE高剂量组出现肝细胞广泛性坏死，胞核消失，有许多大小不一的脂滴空泡，偶有灶性炎症；PMEE低剂量组可见多数汇管区有大量库普弗细胞浸润，多数肝细胞水肿，有少量肝细胞胞质内可见小泡性或细颗粒状脂质空泡；PMEE灵芝菌转化组随着二苯乙烯苷含量降低，肝脏损伤程度也减轻，二苯乙烯苷转化率为100%组基本上未见肝细胞损伤。结论 灵芝菌生物转化能降低何首乌特异质肝毒性，减毒作用与减少何首乌中二苯乙烯苷含量相关。

• 单位
  湖南中医药大学