hnRNPU过表达抑制PIM1诱导的细胞衰老的机制研究

作者：肖雅雯; 阳检明^*

来源：天津医科大学学报, 2023, 29(02): 137-169.

• 人前病毒整合位点1
• 核异质核糖核蛋白U
• 细胞衰老

目的：探讨人前病毒整合位点1(PIM1)诱导细胞衰老的分子机制。方法：构建过表达PIM1的2BS细胞系，通过Western印迹法和衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验测定过表达PIM1是否诱导细胞衰老。免疫沉淀联合质谱分析测定PIM1是否能有效免疫沉淀核异质核糖核蛋白U(hnRNPU)蛋白。运用Real-time PCR和Western印迹法测定PIM1是否影响hnRNPU mRNA和蛋白表达水平。构建同时过表达PIM1和hnRNPU的2BS细胞系，运用Western印迹法和衰老相关β-半乳糖苷酶染色实验检测hnNRPU过表达对PIM1诱导的细胞衰老的影响。结果：与空载对照组相比，过表达PIM1组中衰老信号通路关键基因p53、p21和p16的表达显著增加（p53,t=4.36,P<0.05;p21,t=3.814,P<0.05;p16,t=4.72,P<0.01），衰老细胞的比例增加（t=6.831,P<0.01）。免疫沉淀联合质谱分析结果显示PIM1能有效免疫沉淀hnRNPU蛋白。PIM1过表达对hnRNPU的mRNA表达水平没有影响（t=0.295,P=0.783），但是能抑制hnRNPU蛋白的表达（t=33.85,P<0.001）。与只过表达PIM1细胞相比，同时过表达PIM1和hnRNPU细胞，衰老信号通路关键基因p53、p21和p16的表达下降（p53,t=15.317,P<0.001;p21,t=8.012,P<0.01;p16,t=14.08,P<0.001），衰老细胞的比例降低（t=10.38,P<0.01）。结论：hnRNPU过表达抑制PIM1诱导的细胞衰老。

• 单位
  基础医学院; 天津医科大学