摘要
目的探讨微小RNA(miR)-135b-5p在食管鳞癌发生发展中的调节作用和机制。方法通过收集食管鳞癌患者的组织标本28例, 检测miR-135b-5p在食管鳞癌组织中的表达水平, 分析比较高表达与低表达组的差异, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验、Transwell实验及蛋白质印迹法(Western blot)实验探究miR-135b-5p在食管鳞癌细胞中的调节作用, 利用生物信息学技术从数据库中寻找miR-135b-5p的下游信号通路。组间比较采用T检验或卡方检验。结果 miR-135b-5p在食管鳞癌患者中低表达(0.004比0.014, Z=-2.89, P<0.01)且与T分期相关(χ2=5.82, P<0.05)。此外, 划痕实验发现24 h后对照组划痕空白面积低于高表达组(ECA109:0.22±0.02比0.26±0.01, t=2.21, P<0.05;KYSE150:0.33±0.01比0.54±0.02, t=9.77, P<0.01), Transwell实验说明24 h后高表达组细胞迁移数量低于对照组(ECA109:47.17±4.98比136.00±7.78, t=9.62, P<0.01;KYSE150:25.83±2.10比153.00±7.49, t=16.34, P<0.01), 48 h后高表达组细胞侵袭数量低于对照组(ECA109:171.00±24.02比382.30±15.34, t=7.42, P<0.01;KYSE150:244.00±27.33比493.70±53.23, t=4.17, P<0.01), 高表达组p-smad2/3蛋白表达低于对照组(ECA109:0.82±0.02比1.10±0.03, t=7.70, P<0.01;KYSE150:0.28±0.02比0.73±0.02, t=14.12, P<0.01)。结论 miR-135b-5p可能通过下调smad2/3磷酸化水平抑制食管鳞癌细胞的迁移与侵袭。
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单位苏州大学附属第三医院