miR-325-3p靶向CLDN1调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移

作者：施喆; 韩艳珍^*; 周丽媛; 王艳春; 单铁强; 单铁英; 聂晓进; 刘记平; 朱艳梅; 袁红伟

来源：现代消化及介入诊疗, 2022, 27(07): 852-858.

• 微小核糖核酸-325-3p
• 紧密连接蛋白1
• 肝癌
• 增殖
• 侵袭
• 迁移

目的 探讨微小核糖核酸-325-3p(miR-325-3p)靶向紧密连接蛋白1(CLDN1)调控人肝癌细胞增殖、侵袭与迁移的作用。方法 将对数生长期的人肝癌细胞株SMMC-7721分为四组：阴性对照组、上调组、下调组和正常组。荧光显微镜观察各组细胞转染效率；细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖活性；侵袭小室(Transwell)实验检测各组细胞侵袭和迁移活性；实时-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞miR-325-3p、CLDN1、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)信使核糖核酸(mRNA)表达；免疫印迹法(WB)检测各组CLDN1、ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2蛋白表达及p-ERK1/2水平；双荧光素酶报告基因检测验证miR-325-3p对CLDN1的作用。结果 阴性对照组、上调组和下调组细胞转染效率分别为(91.38±16.21)%、(92.17±15.93)%、(94.12±17.05)%;与正常组、阴性对照组和上调组比，下调组细胞吸光度值上升，增殖抑制率显著下降，侵袭细胞数和迁移细胞数增加，miR-325-3p表达和E-cadherin mRNA和蛋白表达显著下降，CLDN1、N-cadherin、Vimentin、MMP-2 mRNA和蛋白表达上升，ERK1/2 mRNA表达上升，p-ERK1/2水平、p-ERK1/2/ERK1/2水平上升，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);双荧光素酶报告基因实验证实miR-325-3p可靶向调控CLDN1的表达。结论 miR-325-3p可抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移，可能与靶向CLDN1,抑制ERK1/2表达，促进E-cadherin表达，抑制N-cadherin、Vimentin、MMP-2表达相关。

• 单位
  邯郸市第一医院; 秦皇岛市海港医院; 邯郸市中心医院; 曲周县医院; 河北工程大学; 邯郸市第二医院; 河北工程大学附属医院