水稻中5个FT-Like家族成员的基因编辑突变体的创建与分析

作者:王鑫; 杨晓颖; 田瑶; 周诗晨; 兰志鹏; 王馨翊; 胡又川; 梁闪闪; 张泗举*; 栾维江*
来源:天津师范大学学报(自然科学版), 2022, 42(02): 46-54.
DOI:10.19638/j.issn1671-1114.20220207

摘要

为了揭示水稻中FT-like亚家族成员的生物学功能,采用CRISPR/Cas9技术对其中的OsFTL4、OsFTL5、OsFTL6、OsFTL7和OsFTL11进行基因编辑.在5个基因的编码区各选择1个靶点构建1个融合的sg RNA表达框,将表达框装载到CRISPR/Cas9表达载体中,通过农杆菌介导的遗传转化法侵染水稻品种中花11的愈伤组织,得到转基因植株.利用靶点区域的特异性引物进行测序分析,得到3种不同类型的突变,分别为osftl4osftl5osflt6三突变体、osftl4osftl5osflt6osftl11四突变体和osftl4osftl5osflt6osftl7osftl11五突变体.这些突变均导致目标基因序列发生移码突变,进而影响氨基酸序列.观察突变体表型,发现3种类型的突变体均出现了叶片早衰的表型.

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