摘要
目的探讨微小RNA(microRNA, miR)-155对氧化型低密度脂蛋白(oxidized-LDL particles, oxLDL)活化的RAW264.7细胞分泌的趋化因子的调控作用及其对辅助性T细胞1(helper T cell 1, Th1)分化的间接调控作用。方法培养RAW264.7细胞, 向细胞内转染寡聚核苷酸(miR-ctrl、miR-155 mimics、miR-155 inhibitor、miR-155 mimics+siRNA-ctrl和miR-155 mimics+CXCL10 siRNA), 并以此对细胞进行分组。oxLDL刺激所有细胞活化, 实时定量反转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, qRT-PCR)和酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA)方法检测趋化因子表达情况, 将上述细胞与纯化并活化的CD4+T细胞共培养后, 流式细胞术检测Th1细胞的分化情况。结果 miR-155促进oxLDL活化的RAW264.7细胞分泌CXCL10(mRNA水平:oxLDL刺激细胞6、12和24 h的F值分别为44.86、214.91、688.88;蛋白水平:oxLDL刺激细胞6、12和24 h的F值分别为284.57、144.66、60.95, P值均<0.05);在RAW264.7中上调miR-155的表达可促进CD4+T细胞分化为Th1细胞(F=26.72, P<0.05);阻断RAW264.7细胞中CXCL10的表达则抑制miR-155对Th1细胞的间接调控作用(t=3.78, P<0.05)。结论 miR-155可通过促进oxLDL活化的RAW264.7细胞分泌CXCL10间接促进Th1细胞分化。
- 单位