一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用

作者：蓝东明; 李爽; 王永华; 杨博; 王方华; 刘萱

来源：2021-06-18, 中国, ZL202110679849.6.

本发明属于酶工程领域,公开了一种海洋微生物脂肪酶嵌合体及其构建方法和应用,脂肪酶嵌合体氨基酸序列如SEQ NO.1所示,编码脂肪酶嵌合体的基因核苷酸序列如SEQ NO.2所示。构建方法如下：(1)pcr扩增出GMGL的N端前160个氨基酸肽段；(2)无缝克隆方式将步骤(1)的氨基酸肽段替换到CoMGL对应肽段得到重组质粒；(3)将测序成功的重组质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞内进行异源表达与纯化,得到脂肪酶嵌合体160。改造后的嵌合体160在最适条件的比酶活为741.8U/mg,是野生型CoMGL的4.9倍,是野生型GMGL的2.7倍；最适反应温度为70℃,具有良好的工业应用前景。

• 单位
  华南理工大学