微小RNA-145调控磷脂酶Cε1抑制食管鳞癌的研究

作者：李昀; 唐莼; 黄邵洪; 何锦园; 安军; 刘立宝; 劳深; 张军航

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(09): 1472-1475.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.09.011

• 微小RNA-145
• 磷脂酶Cε1
• 食管癌
• 增殖
• 侵袭

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-145调控食管鳞癌(ESCC)细胞增殖与侵袭的分子机制。方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-145和磷脂酶Cε1(PLCE1)mRNA表达;Western blot检测PLCE1蛋白水平;Targetscan软件预测PLCE1是否为miR-145的靶基因;荧光素酶报告基因检测miR-145是否作用于PLCE1 mRNA的3’端非编码区域(3’UTR);噻唑蓝(MTT)和划痕实验检测细胞增殖和侵袭能力。结果 4种ESCC细胞miR-145相对表达量分别为0.63±0.06、0.72±0.05、0.55±0.05、0.79±0.04,均明显低于正常食管上皮细胞(P=0.000,P=0.001,P=0.000,P=0.003)。ESCC组织中miR-145相对表达量为0.68±0.03,较正常组织降低31.9%(P=0.000)。miR-145低表达与肿瘤浸润深度及TNM分期相关(X2=8.380,P=0.039;X2=6.810,P=0.033)。Targetscan预测PLCE1是miR-145的靶基因;荧光素酶报告基因证实miR-145作用于PLCE1 mRNA的3’UTR。ESCC细胞中PLCE1相对表达量分别为1.69±0.04、1.46±0.06、1.31±0.06、1.60±0.08,均明显高于正常食管上皮细胞(P=0.000,P=0.000,P=0.004,P=0.001)。ESCC组织中PLCE1相对表达量为1.85±0.04,为癌旁正常组织的1.85倍(P=0.000)。PLCE1表达水平与miR-145表达水平负相关(r=-0.828,P=0.002)。过表达miR-145抑制Eca109增殖(P=0.006),侵袭能力降低22.1%(P=0.013);过表达PLCE1促进增殖(P=0.003),侵袭能力增强24.9%(P=0.029);而同时过表达miR-145与PLCE1则可抑制PLCE1的促增殖(P=0.003)和侵袭能力(P=0.001)。结论 miR-145通过靶向调控PLCE1抑制ESCC细胞增殖和侵袭。

• 单位
  中山大学; 广州市第一人民医院