外源性microRNA介导的RNA干扰抑制HBV复制和表达

作者：郜玉峰; 余莉; 叶珺; 邹桂舟; 李家斌; 沈继龙; 李旭

来源：安徽医科大学学报, 2010, 45(04): 443-446.

DOI：10.3969/j.issn.1000-1492.2010.04.001

• 肝炎病毒
• 乙型
• RNA
• 小分子干扰 hepatitis virus
• B type
• RNA
• small interfering

目的设计并构建靶向HBV的外源性microRNA表达载体,观察其对HBV表达和复制的抑制作用。方法以HBVP基因和X基因为靶基因,根据pcDNA6.2-G/W-miR载体要求,设计靶向HBV的microRNA序列,进行直接合成获得目的片段并克隆到载体中,测序正确的载体通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR、乙肝五项定量和荧光定量PCR检测其对HBVmRNA和HBVDNA的抑制作用。结果质粒的转染效率为50%～60%,在这种状态下,外源性microRNA表达载体在HBVmRNA和HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平上均能显著抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达(...

• 单位
  安徽医科大学第二附属医院; 安徽医科大学第一附属医院