结核分枝杆菌优势蛋白ppe37的表达纯化以及对巨噬细胞NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达的影响

作者：张瑞芹; 汤建中; 赵志军; 贾伟; 魏军; 张一琳; 张兆波; 徐广贤

来源：中国人兽共患病学报, 2013, (08): 803-807.

• 结核分枝杆菌
• ppe37蛋白
• RAW264.7巨噬细胞 Mycobacterium tuberculosis
• ppe37protein
• RAW264.7macrophage

目的研究在结核分枝杆菌感染过程中,ppe37蛋白引起的巨噬细胞免疫应答反应。方法利用本实验室已构建好的ppe37原核表达载体,将其转化到大肠杆菌E.coli BL21中,用IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE与Western blot鉴定后,利用Ni-Agarose His标签蛋白纯化试剂盒对重组蛋白进行纯化并复性。利用SDS-PAGE和AlpHaImager 2200软件对纯化蛋白进行鉴定与分析。分别用浓度为100ng/mL、500ng/mL、5 000ng/mL的重组ppe37蛋白刺激RAW264.7巨噬细胞,24h、48h、72h后,用Real-time PCR检测RAW264.7巨噬...

• 单位
  宁夏医科大学; 宁夏医科大学总医院