膜型MHC-Ⅰ类分子高表达的GBM U251细胞疫苗的研制及其体外抗瘤作用

作者：谢雪玲

来源：海峡药学, 2016, 28(09): 17-22.

• U251细胞
• 多形性胶质母细胞瘤
• MHC-I
• IFN-γ
• 细胞疫苗
• 免疫治疗

目的探索膜型MHC-Ⅰ类分子高表达人多形性胶质母细胞瘤(GBM)U251细胞疫苗的制备方法及其体外诱导的抗瘤作用机制。方法U251胶质瘤细胞加入02000U·mL-1不同浓度梯度的重组人IFN-γ干预48h;流式细胞仪(FCM)检测不同浓度梯度的重组人IFN-γ诱导后的U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子表达变化情况;取诱导MHC-Ⅰ类分子高表达最高的IFN-γ干预方案作为疫苗的制备方法;体外刺激健康捐献者PBMCs作为效应细胞,MTT比色法检测其对野生型及IFN-γ诱导48h后靶细胞的特异性杀伤活性,同时以抗人HLA-A,B,C行特异性杀伤试验的阻断试验;ELISA法检测效应细胞攻击靶细胞后的IFN-γ、IL-2的分泌情况;FCM检测疫苗刺激前后PBMCs CD4+、CD8+T淋巴细胞比例变化。结果 500U·mL-1IFN-γ诱导48h U251细胞胞膜的MHC-Ⅰ类分子表达率最高,达89.9%;高表达膜型MHC-Ⅰ类分子U251细胞疫苗9在体外具有明显特异性的杀瘤活性的诱导能力(P<0.05);体外可分泌大量的IFN-γ和L-2(P<0.05);CD4+、CD8+明显增高(P<0.05)。结论500U·mL-1 IFN-γ诱导48h是U251细胞胞膜MHC-Ⅰ类分子体外诱导表达的最佳方案;膜型MHC-Ⅰ类分子高表达的U251细胞疫苗休外具有特异性的抗瘤作用,其杀瘤活性与膜型MHC-Ⅰ类分子表达上调有关。

• 单位
  福建医科大学附属第一医院