热休克蛋白70对心肌细胞内质网应激半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-12、C/EBP同源蛋白和c-Jun氨基末端激酶信号通路的影响

作者：孙忠东; 马海峰; 任冠桦; 赵春华^*

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(10).

• 心肌细胞
• 热休克蛋白70
• 内质网应激
• 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-12
• C/EBP同源蛋白
• c-Jun氨基末端激酶通路
• 脱噬作用

目的观察热休克蛋白70(HSP70)表达对心肌细胞内质网应激半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-12、C/EBP同源蛋白(CHOP)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法应用腺病毒基因表达技术诱导热休克蛋白70(HSP70)基因在SD乳鼠心肌细胞的表达和应用HSP70反义寡核苷酸导入技术抑制HSP70的表达,建立细胞培养和心肌细胞缺氧模型,测定细胞凋亡,提取内质网测定,采用免疫组织化学和Western blot方法测定转染前后HSP70的表达水平及HSP70的表达对内质网应激导致的细胞凋亡、Caspase-12、CHOP、JNK通路引起的凋亡信息传递的改变。结果对照组细胞凋亡率(9. 28±0. 83)%、晚期(28. 60±1. 83)%,HSP70基因转染组早期细胞凋亡率(4. 30±0. 72)%、晚期(11. 6±1. 66)%,HSP70反义寡核苷酸处理组早期细胞凋亡率(29. 3±2. 54)%、晚期(34. 4±2. 43)%,免疫组织化学和Western blot证实HSP70基因成功转染入心肌细胞内表达;HSP70表达抑制细胞凋亡,但HSP70反义寡核苷酸则促进;HSP70显著抑制Caspase-12和CHOP的表达,HSP70增加JNK的表达;HSP70反义寡核苷酸组明显增加CHOP的表达。结论转染HSP70表达通过调节内质网应激Caspase-12、CHOP和JNK信号通路调控心肌细胞凋亡。

• 单位
  潍坊市人民医院