液相色谱-串联质谱技术检测干血滤纸片类固醇激素谱方法建立研究

作者：占霞; 韩连书; 叶军; 邱文娟; 张惠文; 梁黎黎; 蒋以植; 侯忱; 顾学范

来源：中国实用儿科杂志, 2017, 32(12): 937-941.

DOI：10.19538/j.ek2017120614

• 液相色谱-串联质谱
• 干血滤纸片
• 类固醇激素

目的建立液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatographytandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测干血滤纸片(dried blood spots,DBS)中类固醇激素谱的方法。方法取含不同浓度类固醇激素(包括雄烯二酮、睾酮、17-羟孕酮、孕酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、皮质醇)的2个DBS(直径3 mm),用含已知类固醇激素内标的1∶1甲醇/乙腈萃取,孵育震荡后氮气吹干,复溶后LC-MS/MS检测。评价方法的线性、精确度、准确度。收集7例21-羟化酶缺乏症患儿及23例正常婴幼儿DBS样本,LC-MS/MS测定样本中类固醇激素浓度。结果 7种类固醇激素批内和批间精确度为3.3%10.9%,准确度为100.4%116.5%,最低检测限为0.030.25μg/L,最低定量限为0.1251.000μg/L;不同浓度的类固醇激素实测浓度与加入浓度之间的相关系数为0.9970.999。21-羟化酶缺乏症患儿DBS样本中雄烯二酮、17-羟孕酮、孕酮、21-脱氧皮质醇、皮质醇浓度均显著高于正常男性婴幼儿,具有统计学意义(P<0.05)。结论本研究建立了LC-MS/MS测定DBS中类固醇激素谱的方法,具有较好的精确度、准确度及浓度线性关系,可用于临床类固醇激素检测,有助于先天性肾上腺皮质增生症的临床诊断及治疗效果评价,并有望用于此病的新生儿筛查。

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院; 上海市儿科医学研究所