外源性EGR1瞬时表达对骨肉瘤细胞细胞周期和凋亡的影响

作者：秦丽; 张惠华; 郭淑军; 段飞蝶; 陈友鹏; 梁旭竞; 陈小佳

来源：中国病理生理杂志, 2011, (02): 293-299.

• 基因
• 早期生长反应
• 瞬时表达
• 骨肉瘤细胞
• 生长抑制 Genes
• early growth response
• Transient expression
• Osteosarcoma cells
• Growth inhibition

目的:获得人早期生长反应1(EGR1)基因,并在人骨肉瘤细胞中瞬时表达,研究该基因在人骨肉瘤细胞中的作用,并探讨其可能的作用机制。方法:以人胎盘组织为模板,巢式PCR(nest PCR)扩增获得EGR1全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),酶切、PCR鉴定并测序正确后,命名为pcDNA-EGR1。脂质体法将重组载体转染人骨肉瘤细胞U2OS,实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫印迹检测目的基因的表达;MTT法检测细胞生长和增殖情况;流式细胞仪和DAPI染色检测细胞的周期变化和凋亡情况;qPCR检测细胞中与细胞周期、凋亡相关基因的表达变化情况;短发夹RNA(shRNA)干扰EGR1后...

• 单位
  暨南大学附属第一医院; 暨南大学