摘要

目的 探讨甲状腺素(thyroxine, T3)和维甲酸(retinoic acid, RA)对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)软骨形成的影响。方法 在3种条件培养基中培养和诱导猪BMSCs成软骨分化:对照组使用软骨生成培养基(含10-7 mol/L地塞米松和10 ng/mL转化生长因子β1),RA组采用软骨生成培养基加1μmol/L RA,T3组采用软骨生成培养基加100 nmol/L T3。采用MTT法单层检测BMSCs的增殖情况。收获第3代BMSCs,离心形成细胞颗粒,分为3组分别进行软骨细胞诱导。4周后采集3组的细胞颗粒,通过组织学染色和半定量基因表达分析进行软骨形成评估。结果 T3组BMSCs增殖高于对照组(P<0.05);RA组BMSCs增殖低于对照组(P<0.05);对照组BMSCs颗粒中观察到软骨特征的类腔隙结构和甲苯胺蓝阳性染色,RA组未见;RA组软骨发生标志基因ColⅡ、蛋白聚糖(aggrecan)和Sox9的表达与对照组相比显著降低,而肥大标志基因ColX的表达在RA组显著增加,成骨相关基因ColⅠ和Runx2的表达也明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);T3组ColⅡ、aggrecan和Sox9的表达显著增加,Col X的表达也显著增加,差异有统计学意义(P<0.05),2组间ColⅠ和Runx2表达,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RA可抑制BMSCs的增殖和软骨形成,T3可促进BMSCs的增殖和软骨形成,但可诱导软骨细胞肥大。

  • 单位
    河南护理职业学院; 首都医科大学附属北京世纪坛医院