应用噬菌体展示技术筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A结合蛋白

作者：钟彦伟; 成军; 张忠东; 杨艳杰; 李强; 董菁; 黄燕萍; 刘敏; 王建军

来源：Y200401006, 2004, (01): 20-22.

• 噬菌体展示技术
• C型肝炎样病毒属
• 病毒非结构蛋白质类
• 基因文库 phage display
• hepatitis C-like viruses
• viral nonstructural proteins
• gene library

目的　筛选丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS4A结合蛋白 ,为HCV致病机制的研究探索新的途径。方法　应用噬菌体展示技术 ,以HCV非结构蛋白NS4A作为固相筛选分子 ,对T7噬菌体人肝细胞cDNA文库进行 5轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选过程 ,经噬斑的PCR扩增后 ,构建克隆载体 ,最后对所筛选克隆进行DNA序列测定和同源性分析。结果　噬菌体经富集后 ,从随机挑选的 12个克隆中得到 2个阳性克隆 ,成功构建了克隆载体。序列测定后经过序列同源性分析 ,确定了与HCV非结构蛋白NS4A结合的是肝细胞蛋白 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)激活蛋白激酶 5 (MAPKAPK5 )。结论　用噬菌体...

• 单位
  解放军第302医院