芜菁多糖除蛋白及抑制RAW264.7巨噬细胞焦亡作用研究

作者：古丽米拉·卡德尔; 阿吉然姆·阿布拉; 任国瑞; 海力茜·陶尔大洪^*; 杨飞^*

来源：食品安全质量检测学报, 2023, 14(02): 183-190.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2023.02.025

• 芜菁
• 多糖
• 细胞焦亡
• 除蛋白

目的 考察芜菁多糖两种方法除蛋白效果,并探讨其对RAW264.7巨噬细胞焦亡的抑制作用。方法 采用AB-8大孔吸附树脂法、Savage法去除蛋白,苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)及三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)建立细胞焦亡模型,细胞毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)检测芜菁多糖对RAW264.7细胞增殖率的影响,免疫印迹实验(Western-Blot,WB)检测消皮素D (gasdermin D,GSDMD)相对表达量,酶联免疫吸附测定法检测白细胞介素-18 (interleukin18,IL-18)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6水平。结果 AB-8大孔吸附树脂除蛋白,多糖保留率为85.9%,蛋白去除率为91.0%;Savage法多糖保留率为77.6%,蛋白去除率为72.8%,精密度、稳定性、重复性和加样回收率的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于2.0%。与模型组相比,芜菁多糖各剂量能显著下调GSDMD的表达(P<0.05),减少LPS/ATP诱导的RAW264.7细胞炎性因子IL-18、IL-1β、TNF-α、IL-6的释放(P<0.05)。结论 AB-8大孔吸附树脂法较Savage法,蛋白去除率及多糖保留率更高;芜菁多糖对LPS/ATP诱导的RAW264.7细胞焦亡具有抑制作用,能在一定程度上减轻细胞损伤,这可能与其抑制LPS/ATP诱导焦亡过程中的炎性反应和调控GSDMD蛋白的表达有关。

• 单位
  新疆医科大学