水稻OsLecRK基因RNAi载体的构建及遗传转化

作者:闸雯俊; 李三和; 胡刚; 陈志军; 刘凯; 周雷; 杨国才; 游艾青
来源:湖北农业科学, 2015, 54(20): 5149-5197.
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.20.056

摘要

凝集素类受体蛋白激酶(Lectin-like receptor kinase,Lec RK)是一类植物特有并分布广泛的蛋白激酶。采用RT-PCR从水稻(Oryza sativa L.)品种B5中克隆了Os Lec RK基因靠近翻译起始位点下游的530 bp的特异基因片段,将该片段以正、反向分别连入p KANNIBAL载体,从而获得p KAN-Os Lec RKRNAi的中间表达载体,进而将其克隆到植物双元表达载体p CAMBIA1301中,构建ds RNAi表达载体p CAMBIA-Os Lec RK-ds RNAi。经酶切和测序鉴定正确后,利用农杆菌介导转化水稻,通过抗性筛选和标记基因hyg进行PCR鉴定,筛选出12株转基因水稻植株。

  • 单位
    湖北省农业科学院粮食作物研究所

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