红花bHLH转录因子基因的克隆、表达分析及植物表达载体构建

作者：姚娜; 刘建雨; 田媛媛; 董园园; 刘秀明^*; 李海燕^*

来源：中国中药杂志, 2019, 44(02): 278-282.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20181106.011

• 红花
• bHLH基因
• 类黄酮
• 表达分析
• 植物表达载体

克隆红花花瓣中bHLH(basic helix-loop-helix)基因,研究其在红花不同开花时期花瓣中的表达量并构建其植物表达载体。利用红花基因组测序结果中富集到的bHLH家族中的基因CtbHLH1的开放阅读框,设计特异性引物进行PCR扩增。利用RT-PCR法分析在红花不同开花时期花瓣中bHLH1基因的表达量,同时构建植物表达载体p BASTA-bHLH1。获得bHLH1基因全长897 bp,编码298个氨基酸。红花bHLH1与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其与烟草的氨基酸序列相似性最高。实时荧光定量PCR分析表明,CtbHLH1基因在红花不同组织及不同开花时期的花瓣中表达水平具有显著差异,其在花瓣中表达量高,开花第3天表达量最高,末花期表达量低。另外其在根中有表达,在茎、叶中表达量极低。该研究成功地对bHLH1基因进行克隆及表达分析,并构建植物表达载体p BASTA-bHLH1。

• 单位
  吉林农业大学; 生命科学学院