摘要
【目的】建立药食同源海藻羊栖菜抑制乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,ACh E)活性油脂成分的优化提取工艺,探明其主要活性组分的具体化学成分。【方法】以提取物质量浓度 1 mg/mL 下的乙酰胆碱酯酶抑制率 ×提取物质量为指标,比较各个溶剂比、料液质量体积比、超声时间和提取次数等四个单因素水平下的抑制 ACh E活性成分提取效果,确定各个单因素中的最优水平范围,进而设计正交实验优化提取工艺条件;按最优提取工艺条件下提取制备粗浸膏,运用硅胶柱色谱法、薄层层析等方法对粗浸膏进行分离纯化并追踪其活性组分,运用气相色谱-质谱联用 GC-MS 进行成分分离与鉴定。【结果】羊栖菜抑制 ACh E 活性成分的最优提取条件为:溶剂乙酸乙酯、石油醚体积比为 5∶5,料液质量(g)体积(m L)比为 1∶10,超声时间 30 min,提取次数 3 次。此条件下对应的提取物质量浓度 1 mg/mL 下乙酰胆碱酯酶抑制率(%) × 提取物质量(g)的值为 7.078 ± 1.038。从该粗提物中分离得到两个具有抑制 ACh E 活性的组分 Fr2 和 Fr3,主要成分为花生四烯酸、亚油酸、油酸等脂肪酸,Fr3 还含有十四烷等多种烷烃。其抑制 IC50值分别为 2.69 mg/mL 和 5.31 mg/mL。【结论】本研究确定的基于石油醚-乙酸乙酯混合溶剂的超声提取工艺可得到较高产量的羊栖菜抑制 ACh E 活性成分,其主要成分为脂肪酸,可能在改善记忆方面具有一定应用价值。
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