碱性成纤维细胞生长因子拮抗细胞外炎性因子保护软骨细胞

作者：杨帆; 刘保一; 曹孟; 朱小姝; 张于; 覃开蓉; 赵德伟^*

来源：中国组织工程研究, 2020, 24(23): 3621-3626.

DOI：10.3969/j.issn.2095-4344.2724

• 软骨细胞
• 细胞增殖
• 细胞分化
• 碱性成纤维细胞生长因子
• 白细胞介素1
• 白细胞介素6
• 肿瘤坏死因子α

背景:目前对于碱性成纤维细胞生长因子促进软骨细胞增殖以及白细胞介素1等炎性因子破坏软骨细胞结构的研究较多,但尚未有二者联合对软骨细胞影响的报道。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子和炎性因子对软骨细胞增殖、分化的影响。方法:取体外培养第3代SD大鼠软骨细胞分为4组:(1)空白对照组:软骨细胞单独培养;(2)阴性对照组:加入含肿瘤坏死因子α、白细胞介素1和白细胞介素6的无血清DMEM/F12培养基进行培养;(3)阳性对照组:加入含碱性成纤维细胞生长因子的无血清DMEM/F12培养基进行培养;(4)实验组:加入含肿瘤坏死因子α、白细胞介素1、白细胞介素6和碱性成纤维细胞生长因子的无血清DMEM/F12培养基进行培养。CCK-8法检测第3,5,7天各组软骨细胞的增殖活性;ELISA检测第3,5,7天各组软骨细胞中炎性因子水平;免疫荧光染色检测第7天各组软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的蛋白水平;Realtime-PCR检测第3,5,7天各组软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的m RNA水平。结果与结论:(1)4组软骨细胞在3个时间点增殖情况,阳性对照组>实验组>空白对照组>阴性对照组;(2)与空白对照组相比,阴性对照组白细胞介素1、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平明显升高(P <0.05);与阴性对照组相比,实验组白细胞介素1、白细胞介素6和含肿瘤坏死因子α水平明显降低(P <0.05);(3)空白对照组、阳性对照组、实验组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖染色均呈现阳性,阳性对照组软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白聚糖表达最显著;(4)与空白对照组相比,阳性对照组、实验组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖在各时间点表达均上调,差异有显著性意义(P <0.05);而阴性对照组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖在各时间点表达均下调,与空白对照组比较差异有显著性意义(P <0.05);(5)结果表明,合理应用碱性成纤维细胞生长因子能有效维持软骨细胞的表型,抑制去分化,促进细胞增殖。

• 单位
  中山大学附属第八医院; 大连大学附属中山医院; 大连理工大学