芍药汤通过cAMP/PKA/CREB信号通路调控溃疡性结肠炎水液代谢及肠上皮通透性的作用机制

作者：吴东升; 曹晖^*; 曹晓阳; 张彧; 谢念佳; 阳玉婷; 芦易; 李嫣红

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(09): 53-60.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230704

• 芍药汤
• 溃疡性结肠炎
• 环磷酸腺苷/蛋白激酶A/环磷酸腺苷反应成分结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)信号通路
• 水液代谢

目的：基于“大肠主津”理论探讨环磷酸腺苷/蛋白激酶A/环磷酸腺苷反应成分结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)信号通路在溃疡性结肠炎(UC)水液代谢及肠上皮通透性中的作用及芍药汤的干预机制。方法：将60只雄性SD大鼠分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.42 g·kg-1)、芍药汤低、中、高剂量组(11.1、22.2、44.4 g·kg-1)，每组10只。采用复合病因造模法建立UC湿热内蕴证大鼠模型，空白组和模型组分别给予生理盐水灌胃，美沙拉嗪组给予美沙拉嗪灌胃，芍药汤低、中、高剂量给予对应剂量的芍药汤灌胃，灌胃周期为14 d。观察各组大鼠腹泻评分及粪便含水率变化，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸含量，免疫组化法检测各组大鼠结肠组织中水通道蛋白(AQP)8、AQP4及肠黏膜通透性相关蛋白ZO-1、Occludin的蛋白表达水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中cAMP、PKA、CREB蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠腹泻评分及粪便含水率显著增高(P<0.01)，血浆二胺氧化酶(DAO)、血浆D-乳酸含量显著增高(P<0.01)，结肠ZO-1、Occludin、AQP8、AQP4、cAMP、PKA、CREB蛋白表达水平显著降低(P<0.01)；与模型组比较，各给药组血浆二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸含量显著降低(P<0.01)，结肠ZO-1、Occludin、AQP8、AQP4、cAMP、PKA、CREB蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论：芍药汤减轻UC腹泻的机制可能是通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路，上调AQPs的表达，增强肠上皮间紧密连接，进而改善结肠水液代谢和肠黏膜通透性。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院; 南京医科大学; 湖南中医药大学