细胞外段V/VC_1区缺失RAGE真核表达载体的构建、转染及在前列腺癌细胞中的表达和定位

作者：洪英洽; 包继明; 李炬聪; 袁平庆; 罗海华; 赵善超; 姜勇

来源：山东医药, 2013, 53(23): 1-5.

DOI：10.3969/j.issn.1002-266X.2013.23.001

• 晚期糖基化终产物受体
• 缺失体
• 真核表达载体
• 前列腺癌

目的构建带HA标签的晚期糖基化终产物受体(RAGE)不同功能段缺失体真核细胞表达载体,使其在前列腺癌细胞株PC-3中过表达并观察其定位。方法采用PCR方法扩增缺失不同功能段V/VC1的RAGE缺失体ΔV/ΔVC1序列,利用分子克隆技术将其重组于pcDNA3-HA载体中,利用PCR和测序鉴定克隆正确性;转染PC-3细胞,用Western blot法检测其表达,免疫荧光法检测其在细胞中的定位。结果 RAGE不同缺失体质粒经测序鉴定无误,并可在PC-3细胞中高表达,且经免疫荧光检测其主要在细胞质中表达。结论成功构建了RAGE不同缺失体的真核表达载体,转染PC-3细胞后呈高表达,其在PC-3细胞中主要定位于细胞质。

• 单位
  南方医科大学第三附属医院; 南方医科大学; 南方医科大学南方医院