摘要
目的:从组织学、分子学层面分别观察针刀干预对膝骨关节炎兔股直肌纤维化的影响,揭示针刀治疗膝骨关节炎可能的作用机制。方法:选取体质量(2.0±0.5)kg的24只健康雄性新西兰兔,采用随机数字表法随机分为空白组、模型组和针刀组,每组8只。采用改良Videman法左后肢伸直位石膏固定制动6周复制KOA兔模型,参照Lequesne MG膝关节级别评分、X线和MRI膝关节影像学检测及股直肌病灶点触诊评价造模成功。针刀组采用经筋理论指导下在股四头肌常见经筋病灶点"鹤顶次"(足阳明经筋病灶点,股四头肌肌腱髌骨正上缘附着处)"、髌外上"(足阳明经筋病灶点,股外侧肌肌腱髌骨外上缘附着处)"、髌内上"(足阳明经筋病灶点,股内侧肌肌腱髌骨内上缘附着处)上行针刀松解治疗,每周1次,共治疗4次。空白组和模型组只做同样的抓取和固定,不予针刀治疗。干预结束1周后,采用Masson染色检测股直肌组织形态和胶原容积分数改变观察针刀对膝骨关节炎兔股直肌纤维化的影响,RT-PCR和Western blot检测股直肌Ⅰ型胶原纤维(ColⅠ)、波形蛋白(VIM)、α-肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白表达水平观察针刀对膝骨关节炎兔股直肌纤维化相关mRNA和蛋白的影响。结果:(1)Masson染色结果显示,空白组可见整齐的被红染的骨骼肌纤维;模型组可见骨骼肌纤维破坏,被大量蓝染的胶原纤维包绕;针刀组可见骨骼肌纤维较为整齐,被少量蓝染的胶原纤维包绕。模型组股直肌胶原容积分数较空白组增加,差异有统计学意义(P<0.01);针刀组较模型组股直肌胶原容积分数减小,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)RT-PCR结果显示,模型组ColⅠ、VIM、α-SMA mRNA表达较空白组升高,差异有统计学意义(P<0.01);针刀组较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)Western blot结果显示,模型组ColⅠ、VIM、α-SMA蛋白表达较空白组升高,差异有统计学意义(P<0.01);针刀组较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:基于经筋理论针刀松解股四头肌经筋病灶点能下调ColⅠ、VIM、α-SMA mRNA和蛋白的表达水平,减轻股直肌纤维化程度,这可能是针刀治疗KOA作用机制之一。
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