摘要
垂盆草作为药赏食多功能植物,研究日益深入,但分子生物学方面研究基础还较薄弱。为了筛选垂盆草中稳定表达的内参基因,确保基因表达结果的可靠性,采用qRT-PCR技术对来自垂盆草转录组数据的6个内参基因(GAPDH, ACT, ALDH, RPL, HAF 1, TUB)在垂盆草根、茎、叶,以及外源H_(2)O_(2)和干旱处理的垂盆草叶片中的表达水平进行检测,并结合Delta CT法以及GeNorm、NormFinder、Bestkeeper软件和RefFinder在线工具综合评价6个内参基因的稳定性。结果显示,不同处理下各候选内参基因的表达稳定性具有明显差异,其中Delta CT法和NormFinder软件分析结果均以GAPDH表达最稳定;GeNorm软件分析结果以GAPDH和HAF1表达较稳定;Bestkeeper软件分析结果显示HAF1表达最为稳定;RefFinder网站综合排序稳定性最好的基因为GAPDH,而TUB稳定性最差。因此,GAPDH适合作为垂盆草不同部位及H_(2)O_(2)和干旱处理下基因表达研究的内参基因。该研究筛选得到的稳定内参基因GAPDH为后续开展垂盆草关键基因表达分析研究提供了理论依据。
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