AMPKg在NSCLC组织中表达及对A549细胞增殖迁移机制探讨

作者：刘婷婷; 关新红; 宋佳; 吴莉^*

来源：中华肿瘤防治杂志, 2021, 28(02): 123-130.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2021.02.06

• 非小细胞肺癌
• 腺苷酸活化蛋白激酶亚基gama
• Akt/mTOR
• 肿瘤进程

目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)亚基γ(AMPKg)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况和对NSCLC细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制。方法选取2010-01-01-2014-01-01新疆医科大学附属肿瘤医院120例NSCLC患者临床和病理资料。免疫组化法检测NSCLC癌组织及癌旁组织AMPKg的表达,根据免疫评分分为高表达组和低表达组。采用NSCLC A549细胞株进行实验,慢病毒转染抑制NSCLC细胞中AMPKg的表达,分为shCtrl组(转染空病毒组)和shAMPKg组(慢病毒shRNA-AMPKg组)。细胞增殖实验、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。蛋白质印迹法检测蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(Akt/mTOR)信号通路相关分子变化。KaplanMeier绘制生存曲线,Log-rank检验AMPKg高表达和低表达组别总生存率的差异,单因素和多因素Cox风险回归模型分析影响NSCLC预后的独立危险因素。结果 120例NSCLC患者中,AMPKg阳性率为58.3%(70/120)。AMPKg的异常表达与NSCLC患者病理类型(χ2=7.792,P=0.005)和TNM分期(χ2=15.664,P<0.001)相关。单因素Cox分析中病理类型(HR=1.945,95%CI:0.521～1.548,P=0.046)、TNM分期(HR=1.677,95%CI:1.267～2.351,P=0.002)和AMPKg表达(HR=2.438,95%CI:1.706～4.581,P<0.001)是影响NSCLC患者预后的危险因素。多因素Cox分析中,TNM分期(HR=1.522,95%CI:1.032～2.166,P=0.004)和AMPKg表达(HR=2.093,95%CI:1.103～3.537,P=0.031)是影响NSCLC患者预后的主要独立危险因素。中位生存期AMPKg高表达组(38.6个月)低于低表达组(59.3个月),χ2=20.020,P<0.001,AMPKg高表达的患者预后较差。细胞实验结果显示抑制AMPKg表达后,shAMPKg组细胞增殖能力在第4天(F=83.070,P<0.001)、第5天(F=81.200,P<0.001)降低。shAMPKg组细胞划痕愈合率为(84.80±6.31)%,小于shCtrl组(78.08±6.53)%,t=6.106,P=0.003。shAMPKg组和shCtrl组A549细胞迁移数分别为(96.84±39.86)个和(423.30±31.91)个,差异有统计学意义,t=11.070,P=0.004。shAMPKg组细胞和shCtrl组A549细胞侵袭数分别为(119.23±21.76)个和(561.67±15.67)个,差异有统计学意义,t=28.580,P<0.001。Akt/mTOR信号通路中shAMPKg组p-mTOR、p-AKT、EIF4G蛋白表达减少。结论高表达AMPKg可能预测NSCLC患者的疾病进展和不良预后,AMPKg促进NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能通过调节Akt/mTOR信号通路影响NSCLC的进展,提示AMPKg可能是NSCLC的一种潜在分子标志物。

• 单位
  中心实验室; 新疆医科大学附属肿瘤医院