VEGF-C基因3′端未翻译区对荧光素酶表达的影响

作者：王俊; 郭燕; 章必成; 关华军; 陈正堂

来源：解放军医学杂志, 2007, (09): 922-925.

• 血管内皮生长因子C
• 3&prime
• 未翻译区
• 荧光素酶
• 淋巴管生成 vascular endothelial growth factor C
• 3' untranslated regions
• luciferase
• lymphangiogenesis

目的构建小鼠血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因3′端未翻译区(3′UTR)的荧光素酶表达载体,利用双荧光报告系统观察VEGF-C基因3′UTR对荧光素酶基因表达的影响。方法通过PCR分别扩增小鼠Lewis肺癌细胞VEGF-CcDNA全长3′UTR(429bp)和一段312bp的编码区序列(CR),采用基因工程方法将PCR产物克隆至pTA2克隆载体,随后再亚克隆至荧光素酶报告基因载体(pGL3-Promoter)荧光素酶编码基因下游的XbaⅠ酶切位点,使用LipofectamineTM2000真核转染小鼠Lewis肺癌细胞,化学发光法检测荧光素酶的活性,定量RT-PCR检测荧光素酶mRNA...

• 单位
  新桥医院; 中国人民解放军广州军区武汉总医院