中华泰勒虫MPSP基因的原核表达及反应原性分析

作者:赵帅阳; 李有全; 刘爱红; 刘军龙; 刘志杰; 马米玲; 任巧云; 赵洪喜; 杨聪山; 卢海燕; 殷宏; 关贵全; 罗建勋
来源:中国兽医科学, 2014, 44(07): 690-696.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2014.07.016

摘要

用生物信息学方法,对中华泰勒虫的梨浆虫主要表面蛋白(major piroplasm surface proteins,MPSP)基因的核苷酸序列及编码蛋白的氨基酸序列进行了分析,并对该蛋白的抗原表位、信号肽以及跨膜区进行了预测。设计特异性引物,对中华泰勒虫MPSP基因进行了克隆和原核表达,并对融合蛋白的反应原性进行了分析。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白的分子质量约为38ku,分布于上清中。Western-blot试验表明,融合蛋白仅与抗His标签蛋白的单克隆抗体、中华泰勒虫阳性血清、瑟氏泰勒虫阳性血清、环形泰勒虫阳性血清发生反应,而与其他泰勒虫、巴贝斯虫和绵羊无形体阳性血清不发生反应。这些结果表明,中华泰勒虫MPSP可作为ELISA诊断方法的候选抗原。

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