摘要

目的:制备可控性大鼠卵巢癌树突状细胞(DCs)活疫苗并检测其免疫生物活性。方法:从大鼠Fischer344骨髓前体细胞中分离、扩增DCs,与转导有自杀基因Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(HSV1-tk)基因的大鼠卵巢癌细胞株NuTu-19/tk融合制成活疫苗。以流式细胞仪、激光共聚焦显微镜分析此活疫苗的生物学特征;LDH释放法检测其细胞毒活性(CTL);MTT法测定其对丙氧鸟苷(GCV)的反应性。结果:细胞融合率为28.14%,融合细胞呈典型的双阳性表现,高表达表面分子MHC-Ⅱ(OX6)、B7-2、OX62和ICAM-1。CTL结果显示活疫苗组对亲本肿瘤细胞的杀伤活性最强,死疫苗组次之,DCs与NuTu-19/tk混合组最差(P<0.01)。100μg/mlGCV对活疫苗的杀伤率为88.42%。结论:卵巢癌DC融合活疫苗在体外可产生明显的抗肿瘤免疫效应,并可通过自杀基因的杀伤作用将其在体外灭活。将自杀基因系统引入肿瘤活疫苗,为制备有效而安全的肿瘤疫苗提供了新思路。

  • 单位
    复旦大学附属妇产科医院; 遗传工程国家重点实验室; 上海市肿瘤研究所; 复旦大学