干扰长链非编码RNA MALAT1对结肠癌SW 480细胞生长、侵袭和裸鼠成瘤的影响

作者：裴正浩; 王耿泽; 夏西超; 张虎; 王钧; 郝阳

来源：广东药学院学报, 2022, 38(05): 83-89.

DOI：10.16809/j.cnki.2096-3653.2022031101

• 结直肠癌
• 肺腺癌转移相关转录本1
• miR-145
• 增殖
• 侵袭
• JAK2/STAT3

目的 探讨干扰肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)对结肠癌SW480细胞生长、侵袭及裸鼠成瘤的影响及其作用机制。方法 构建shRNA-MALAT1质粒载体，并与miR-145 inhibitor单独或联合转染人结肠癌SW480细胞，以转染空载体的细胞作为Control组。采用双荧光素酶报告基因实验验证MALAT1与miR-145靶向关系；qRT-PCR检测转染效率；分别使用Brdu法、Transwell实验检测SW480细胞增殖、侵袭；Western blot及免疫荧光检测细胞侵袭相关蛋白表达。取10只裸鼠，分别于皮下注射转染空载体（Control组）和shRNA-MALAT1(shRNA-MALAT1组)的SW480细胞构建结直肠癌移植瘤模型，测量肿瘤体积变化并于30 d后取瘤，采用免疫组化法检测肿瘤组织中Ki67、VEGF表达。结果 共转染miR-145 mimic和野生型MALAT1报告基因载体后，SW480细胞的荧光素酶活性显著降低（P<0.05）。与Control组比较，shRNA-MALAT1组Brdu阳性细胞数、侵袭细胞数、N-cadherin、Vimentin、JAK2、p-STAT3/STAT3均显著降低（P <0.05）,E-cadherin蛋白表达显著增加（P <0.05）;miR-145 inhibitor组Brdu阳性细胞数、侵袭细胞数、N-cadherin、Vimentin、JAK2、p-STAT3/STAT3均显著增加（P<0.05）,E-cadherin蛋白表达显著降低（P <0.05）。与miR-145 inhibitor组比较，shRNA-MALAT1+miR-145 inhibitor组Brdu阳性细胞数、侵袭细胞数、N-cadherin、Vimentin、JAK2、p-STAT3/STAT3均显著降低（P <0.05）,E-cadherin蛋白表达显著增加（P <0.05）。体内实验中，与Control组比较，shRNA-MALAT1组裸鼠成瘤体积显著降低（P<0.05），肿瘤组织中Ki67、VEGF蛋白表达显著降低（P<0.05）。结论 敲低MALAT1可通过负调控miR-145抑制结直肠癌SW480细胞的增殖、侵袭及体内成瘤能力。

• 单位
  南阳市中心医院; 平顶山学院