表达人单核细胞趋化蛋白-1基因重组腺病毒的制备

作者：彭和平; 李永国; 关浩; 汪普宁; 刘启才

来源：中国医师杂志, 2006, (05): 619-621.

• 单核细胞化学吸引蛋白质类/生物合成
• 腺病毒科
• DNA
• 重组 Monocyte chemoattractant proteins/biosynthesis
• Adenoviridae
• DNA
• recombinant

目的制备表达人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)复制缺陷型重组腺病毒。方法RT-PCR法获得人肝组织中MCP-1cDNA片段,与T载体连接后亚克隆至腺病毒穿梭载体的巨细胞病毒启动子下游,构建重组穿梭载体pAdTrack-CMV-MCP-1,将其线性化后与pAdEasy-1共转化大肠杆菌B J5183,进行同源重组得到重组腺病毒载体。将重组腺病毒载体转染入包装细胞HEK293内制备复制缺陷型重组腺病毒,PCR扩增鉴定病毒颗粒。结果MCP-1重组腺病毒载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装,5 d后可以观察到绿色荧光蛋白(GFP)明显表达,搜集的病毒经过PCR扩增得到特定MCP-1基因片...

• 单位
  中南大学湘雅二医院; 广州医科大学