HTK液冷保存大鼠后肾原基同种和异种移植研究

作者：徐剑; 孙亚辉; 李仲洋; 黄业宁; 徐春岳; 洪良杰; 万云乐^*

来源：中华实验外科杂志, 2019, 36(08): 1437-1441.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2019.08.031

• 后肾原基
• 同系移植
• 异种移植
• 保存液
• 器官形成

目的 比较Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate (HTK)与Uinversity of Wisconsin Solution(UW)液冷保存大鼠后肾原基同系和异种裸小鼠移植的效果,探索器官保存液评价新模型。方法 从受孕第16天(E16)近交系Lewis(RTl1)大鼠提取后肾原基,以0～4 ℃ HTK或UW液保存24、48、72、96 h,植入Lewis鼠(Lewis→Lewis)和BALB/c裸小鼠(Lewis→BALB/c)网膜。体外比较原基乳酸脱氢酶(LDH)释放率(%)和三磷酸腺苷(ATP)存量(%)；在体观察发育后肾结构,比较后肾移植成活率和移植后肾菊粉清除率。实验所得数据以均值±标准差(Mean±SD)表示,率的比较采用χ2检验,两独立样本比较采用t检验,其他参数作方差分析。结果 HTK冷保存24、48、72、96 h,原基LDH释放率分别为(6.5±1.1)%、(8.6±0.9)%、(11.3±1.3)%、(12.5±0.8)%,逐渐升高,各时段均较UW液组为低,差异无统计学意义(F＝0.752,P>0.05)；ATP存量为(71.8±4.6)%、(53.7±4.8)%、(35.8±3.4)%、(11.1±1.7)%,逐渐降低,尤以96 h明显,在72 h较UW液组低(t＝－2.725,P<0.05),其余时段相当(F＝0.812,P>0.05)。经HTK液保存3 d,E16后肾原基体积和结构无明显变化,在同种(Lewis→Lewis)或异种(Lewis→BALB/c)网膜中都发育良好,病理和电镜检查正常；HTK液保存24、48、72、96 h的受体Lewis鼠和裸小鼠后肾移植成活率分别为100.0%、100.0%、73.3%、0%(χ2＝1.553,P>0.05)和100.0%、100.0%、80.0%、0%(χ2＝0.653,P>0.05)；保存72 h Lewis鼠移植后肾菊粉清除率(32.10±5.09) μl/(min·g),与UW液差异无统计学意义(t＝－0.264,P>0.05)。结论 大鼠E16后肾原基以HTK液保存3 d,可以在同种和异种受体网膜内生长发育,形成器官并发挥功能。后肾原基同系或异种裸小鼠移植可能是评价器官保存液的有效模型。

• 单位
  浙江大学; 海南医学院第二附属医院; 中山大学