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摘要
UDP-鼠李糖是一种由鼠李糖合成酶(rhamnose synthase, RHM)催化合成的糖苷供体，是合成各种鼠李糖糖苷类次生代谢产物的重要组成之一。该研究从甜橙中首次克隆得到一个RHM基因(CsRHM),并进行生物学信息分析，体外功能鉴定等特异性分析。结果显示CsRHM的开放阅读框为2 007 bp,编码668个氨基酸，推测相对分子质量为75.27 kDa,理论等电点为6.97,具有RHM酶家族的特征信号序列(GxxGxxG/A和YxxxK)。多序列对比与系统进化树显示，CsRHM与其他物种的RHM具有同源性。体外酶促反应结果证实CsRHM重组蛋白具有将UDP-葡萄糖转化为UDP-鼠李糖的催化活性，并且明确了其催化的酶动力学参数Vmax=0.373 7μmol·L-1·min-1,Km=21.29μmol·L-1,Kcat=0.24 s-1,Kcat/Km=1.13×104 s-1·L·mol-1。该研究首次报道了CsRHM,并验证了其体外催化功能，为进一步研究生物合成UDP-鼠李糖奠定基础。
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