摘要
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-497在膀胱癌细胞株中的表达,探讨miR-497对膀胱癌上皮-间充质转化(EMT)过程的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-497在膀胱细胞株和正常膀胱黏膜组织中的表达。将miR-497 mimics/inhibitor分别瞬时转染至膀胱癌EJ细胞中,通过显微镜细胞形态学观察、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验,分析过表达或下调内源性miR-497的表达对EJ细胞形态、迁移和侵袭的影响;Western blot法检测EMT标志物相关蛋白表达的变化。结果与膀胱永生化上皮细胞(SV-HUC-1),miR-497在5株膀胱癌细胞株中均呈低表达状态(P=0.000)。过表达miR-497后,EJ细胞表现为上皮样细胞形态,EJ细胞的迁移率为(25. 33±6.11)%,较其阴性对照组(74. 00±3. 61)%降低2. 96倍,侵袭细胞个数为(109±3)个,较其阴性对照组[(219±17)个]降低2倍;而抑制miR497表达后,EJ细胞表现为间质样细胞形态,EJ细胞的迁移率为(74.00±3. 61)%,较其阴性对照组[(51. 33±6.51)%]增加1. 45倍,侵袭细胞个数为(320±14)个,较其阴性对照组[(248±16)个]增加1. 29倍。Western blot结果显示:与阴性对照组比较,过表达miR497可使EJ细胞的E-钙黏素(E-cadherin)表达增加(P=0.000), N-钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达减少(P=0. 001,P=0. 000)。结论 miR497可能参与膀胱癌EMT过程的调节。
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