基于药物转运体的小白菊内酯衍生物ACT001的跨膜转运机制和耐药性研究

作者：孙英辉; 尚海花; 慈小燕^*; 武卫党; 王泽; 崔涛; 曾勇; 闫凤英; 伊秀林^*

来源：中草药, 2022, 53(12): 3711-3719.

• 小白菊内酯衍生物ACT001
• 药物转运体
• 抑制作用
• 诱导作用:耐药性
• 药物-药物相互作用

目的 从药物转运体角度探讨小白菊内酯衍生物ACT001的跨膜转运机制，并阐明ACT001可能产生的耐药性机制。方法 采用人药物转运体高表达单克隆细胞株/囊泡、人结肠腺癌细胞（Caco-2、LS-180），使用q RT-PCR、Western blotting、LC-MS/MS放射性同位素示踪等技术手段，共同研究ACT001的跨膜转运机制和耐药性。结果 小白菊内酯衍生物ACT001能够抑制外排转运体BCRP的转运活性，其半数抑制浓度（half inhibitory concentration,IC50）为48.6μmol/L。ACT001在Caco-2细胞单层上的外排率为2.95，添加乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein,BCRP）抑制剂Ko143可使外排率降至0.807；添加P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）抑制剂盐酸维拉帕米对ACT001的外排率没有影响。在LS-180细胞中添加10μmol/L的ACT001诱导72 h，可使P-gp和BCRP的m RNA表达水平分别提高8.89、8.21倍，蛋白相对表达量分别提高3.76、2.92倍，表明ACT001能诱导BCRP和P-gp的表达。结论 小白菊内酯衍生物ACT001是外排转运体BCRP的底物，BCRP在血脑屏障和肿瘤细胞中高表达，ACT001到达血脑屏障时，会被BCRP识别外排，导致跨血脑屏障能力下降，不能在靶点位置达到有效的血药浓度从而药效降低。ACT001是BCRP和P-gp的诱导剂，能上调LS-180细胞中2种转运体的m RNA和蛋白表达水平；BCRP和P-gp在血脑屏障和肿瘤组织高表达，对2种蛋白的诱导作用会进一步导致药效下降并产生耐药性，使治疗失败。另外，BCRP和P-gp在体内分布广泛，当ACT001与2种蛋白的抑制剂或底物联用时，由于竞争和诱导作用，会对其他药物的转运产生影响，发生药物-药物相互作用。

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院; 天津中医药大学; 天津药物研究院有限公司; 放射医学研究所