结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-CFP21融合蛋白克隆表达及全血IFN-γ的检测

作者：周舟; **生; 刘忠华; 毛翎; 桂徐蔚; 胡忠义

来源：中国防痨杂志, 2010, 32(04): 211-216.

• 分枝杆菌
• 结核
• 重组融合蛋白质类
• 抗原
• 细菌
• 干扰素Ⅱ型 Mycobacterium tuberculosis
• recombinant fusion proteins
• antigens
• bacterial
• interferon typeⅡ

目的构建结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6-CFP21(CE21)融合蛋白的重组质粒,通过IFN-γ的检测探讨CE21在结核病检测中的价值。方法通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得CFP21和CFP10-ESAT-6(CE)基因片段,分别连接到pMD18-T,并将两片段2次连接到表达载体pET21a( )中,获得pET21a-CFP10-ESAT-6-CFP21重组质粒;经表达纯化和复性后,去除内毒素,利用酶联免疫吸附试验检测48例结核病患者、30例非结核肺部疾病患者及32例健康对照者全血中IFN-γ的释放量。结果CE21经SDS-PAGE分析后相对分子质量为45,与预期大小一致。CE21融...

• 单位
  生命科学学院; 同济大学附属上海市肺科医院; 苏州大学