噬菌体展示EpCAM单链抗体及免疫原性初步研究

作者：刘晓丽; 张岸梅; 林盛; 王欣欣; 廖荣霞; 孙建国; 陈正堂

来源：第三军医大学学报, 2011, (10): 977-979.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2011.10.004

• 单链抗体
• 噬菌体展示
• EpCAM
• 免疫
• 肿瘤干细胞 single-chain antibody
• phage display
• EpCAM
• immunity
• cancer stem cell

目的利用噬菌体展示技术进行鼠抗人EpCAM单链抗体表达并鉴定其免疫活性,构建特异靶向上皮来源肿瘤细胞及癌干细胞的单链抗体。方法采用全基因合成的方法合成VL+Linker+VH的EpCAM的单链抗体(ScFv)基因,克隆到pMD19-T简易载体中,将ScFv基因酶切并纯化后克隆到噬菌体载体pCANTAB-5E,热休克法转化至感受态的大肠杆菌TG1,随机挑取5个克隆,经辅助噬菌体超感染,形成鼠抗人EpCAM噬菌体单链抗体,用ELISA(以P/N>2判定为阳性)和免疫细胞化学法测定其抗原结合活性。结果成功获得pCANTAB-5E/EpCAM ScFv重组克隆,经ELISA和免疫细胞化学测定,噬菌体展...

• 单位
  新桥医院; 中国人民解放军陆军军医大学