摘要
目的探讨内皮前体细胞(endothelial progenitor cell, EPC)来源外泌体对高氧诱导的新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(type Ⅱ alveolar epithelial cells, AECⅡ)损伤的干预作用。方法使用全外泌体分离试剂盒从大鼠EPC培养液中提取外泌体, 将体外培养的新生大鼠AECⅡ分为对照组、高氧组、干预组。对照组为空气+5%CO2培养, 高氧组为95%O2+5%CO2培养, 干预组培养基中加入0.1 mg/ml EPC来源外泌体, 并予95%O2+5%CO2培养。于2、4、6 d使用细胞增殖及毒性检测试剂盒检测AECⅡ活力、流式细胞仪检测AECⅡ凋亡。结果透射电镜观察EPC培养上清中分离的外泌体均符合外泌体的形态学特征。Dil标记EPC来源外泌体后与AECⅡ共培养24 h, 在荧光显微镜下可观察到AECⅡ胞浆中有Dil荧光, 提示EPC来源外泌体可以被AECⅡ摄取进入胞浆。与对照组相比, 高氧组AECⅡ活力受损, 细胞凋亡增加, 并且损伤程度随高氧时间延长而加重(P<0.001)。EPC来源外泌体干预组细胞损伤程度低于高氧组(P<0.001)。与对照组相比, 干预组在高氧4 d、6 d时的细胞活力低于对照组(P值分别为0.029、0.005), 在高氧6 d时的细胞凋亡高于对照组(P=0.007)。结论 EPC来源外泌体干预可减轻高氧诱导对AECⅡ的损伤, 但不能完全逆转损伤。
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单位成都市妇女儿童中心医院; 电子科技大学