TRADD慢病毒载体构建及其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

作者：袁月; 康秀峰; 牟东; 薛世祥; 代剑华; 彭贵勇

来源：第三军医大学学报, 2012, (09): 848-851.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2012.09.013

• TRADD
• 慢病毒表达载体
• 食管再狭窄
• 基因治疗 tumor necrosis factor receptor associated death domain protein
• lentiviral vector
• restenosis of esophagus
• gene therapy

目的构建抗食管支架术后再狭窄携人TRADD基因慢病毒表达载体,并检测其对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法以购买的人TRADD基因为模板,采用PCR法扩增目的基因片段,PCR产物经回收纯化后与线性化的慢病毒表达载体pLVX-EGFP-3FLAG-Puro重组。重组质粒转化DH5α感受态细胞。菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆测序无误后,质粒共转染293FT细胞制备慢病毒。Real-time定量PCR法检测病毒滴度。Western blot检测TRADD-GFP-FLAG融合蛋白的表达。MTT法检测TRADD基因慢病毒对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。结果菌落PCR扩增产物经凝胶电泳,阳性克隆得到...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学