摘要
目的 探讨仙灵骨葆胶囊含药血清对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)增殖分化的影响及与p38 MAPK信号通路的关系。方法 用仙灵骨葆胶囊含药血清干预MC3T3-E1,CCK8法筛选最佳干预时间及浓度,试剂盒检测各组细胞ALP活性。将细胞分为A、B、C、D 4组,分别加入10%含药血清、10%空白血清、10%含药血清+SB203580、10%空白血清+SB203580,利用免疫印迹法(Western blot)检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、磷酸化p38(p-p38)、成骨相关转录因子2(Runx2)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)的蛋白表达量,荧光定量PCR检测p38、Runx2和BMP-2 mRNA的表达水平。结果 与空白血清组相比,不同浓度的仙灵骨葆胶囊含药血清均能促进MC3T3-E1的增殖分化,提高ALP的活性,其中10%含药血清干预36 h的作用最为明显(P<0.05);与B组比较,A组p38、p-p38、Runx2、BMP-2蛋白及p38、Runx2、BMP-2 mRNA的表达明显增高(P<0.05);加入信号通路阻断剂SB203580后,C组与D组上述指标的表达明显降低(P<0.05);与C组相比,D组p38、p-p38、Runx2、BMP-2蛋白及p38、Runx2、BMP-2 mRNA表达更低(P<0.05)。结论 仙灵骨葆胶囊含药血清能促进MC3T3-E1的分化生长,其作用机制可能与激活p38 MAPK信号通路、上调成骨相关因子Runx2、BMP-2的表达有关。
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单位甘肃中医药大学附属医院